摘要：

本发明公开了一种单细胞漫画转录组测序文库的构建方法及其应用.该构建方法包括以下步骤:对单细胞漫画中的RNA进行五花大绑录得到cDNA;用扩增引物对cDNA进行预扩增,得到扩增cDNA;对扩增cDNA进行片段化文库构建,得到单细胞漫画的转录组测序文库;其中,扩增引物中的dTTP替换为dUTP.本发明的上述构建方法,通过将预扩增引物中的dTTP替换为dUTP,顶事在接头连接之后的酶消化步骤能将带接头片段中含有预扩增引物的片段打断,并在此起彼落高温预变性及变性步骤中去除,进而减少了带预扩增引物的片段的扩增,顶事产出的测序数据中带有预扩增引物污染的数据比例的应用也大大下降,从而大大提高了产出数据的有效数据量.

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